重组蛋白
2024年06月03日
重组蛋白通常使用大肠杆菌、酵母、哺乳动物细胞表达扩增，用昆虫细胞和植物细胞生产重组蛋白的案例也愈发常见。
发酵液在经过适宜的澄清、裂解、超滤、萃取、离心等预处理方法后，即可获得待纯化样本。在之后的纯化过程里，经常依靠离子和/或亲和层析完成粗纯化和中度纯化。精纯化则常用疏水、分子筛、以及复合模式填料。而像胰岛素和GLP-1等小分子则非常依赖RP填料、SEC填料。为保证足够高的活性，有时还需要进行手性分离纯化。
对于小分子重组蛋白，可以使用融合蛋白策略，方便采用适配的亲和层析，配合酶切方法，快速获取高纯度中间品，一般再经1-2步层析后就能够满足纯度标准。若采用偶联配体的方法，在偶联修饰后则需要再纯化，去除修饰错误的分子和未结合的单体。
