抗体
抗体是实现免疫功能的重要分子,主要包括IgG1-4、IgA、IgD、IgE、IgM和IgY(禽类)等,可以特异性的结合抗原,实现免疫功能。由于优秀的特异性和生物活性,抗体也在检测、生物分子提取、疫苗、靶向治疗药物开发等领域起着不可替代的作用。为了获取更高的活性/特异性或者实现一些特殊的功能,对抗体的改造是非常常见的情况,现在已经成为一个高度发展的领域。
在抗体的纯化过程中,ProteinA/G/L亲和层析是其中最关键的步骤。亲和层析被要求具备高载量、长寿命、低的配体脱落率和杂质残留、以及耐受高浓度NaOH清洗。精纯化需要按照质量需求灵活设计,较多采用“阴离子+阳离子”或“复合模式层析”,也有使用单步疏水层析进行纯化的情况。
目前双抗的层析纯化与单抗基本相同,但工艺开发难度更大,所花费的精力要多于单抗。这主要是因为双抗在表达过程中分子有更高的错配几率,聚体含量甚至可以达到50%。