VH3亲和填料用于高效分离双特异性抗体(bsAbs)和含有VH3家族序列的抗体片段(Fabs和VHHs)。利用Protein A Fc段特异性结合VH3序列家族Fab段,实现一步高效纯化。该亲和纯化介质具有高动态结合载量,高分辨率等特点。在利用固定化VH3配体进行生物大分子纯化的过程中,配体可能因化学、物理或酶解作用等从纯化柱上脱落。脱落的配体进入最终产品,影响产品质量、安全性和有效性,如下:
1 影响产品纯度,脱落的VH3配体本身作为蛋白质杂质混杂在最终的目标产物中,直接导致最终产品的纯度下降,无法满足严苛的药品质量标准;
2 免疫原性风险,脱落的VH3配体作为外源蛋白,超过一定剂量会引发免疫反应;
3 干扰分析及检测,脱落的VH3配体可能会干扰一些用于监控产品质量的分析方法,导致对杂质水平的错误判断;
因此,对纯化柱洗脱液及中间过程液体中的VH3配体脱落进行监控至关重要。
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA 法实现高灵敏度、高特异性的VH3配体定量检测。捕获抗体已包被于酶标板上,向酶标板中加入标准品(或待测样品),样本和标准品中的VH3配体蛋白会与包被于酶标板上的捕获抗体结合,再加入一抗与VH3配体蛋白结合形成免疫复合物,通过洗板,将游离的成分洗去;加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的二抗,二抗与一抗特异性结合,加入TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)底物,二抗上的HRP催化H2O2 氧化TMB生成蓝色产物,随后加入终止液终止酶催化反应,生成黄色产物。通过酶标仪测定450 nm OD值,VH3配体蛋白浓度与OD450值之间呈正相关,可通过试剂盒内的标准品生成的标准曲线计算出样本中VH3配体浓度。
本试剂盒VH3配体脱落最低检测限度0.06 ng/ml, 检测范围0.06 ng/ml-13.72 ng/ml。
• 订购信息
| 名称 | 货号 | 规格 |
| VH3 脱落检测 ELISA 试剂盒 | SA122K | 96T |
| Smac VH3 Affinity Beads | SA122005 | 5 ml |
| SA122025 | 25 ml | |
| SA122100 | 100 ml | |
| SA122500 | 500 ml | |
| SA12201L | 1 L | |
| SA12210L | 10 L |