Sumo Protease为酿酒酵母ULP1蛋白酶的原核表达产物,特异性识别酿酒酵母的类泛素蛋白(ubiquitin-like protein, Sumo),并在Sumo标签和融合蛋白之间进行切割。该酶识别Sumo标签的三级结构,因此具有极高的特异性。Sumo蛋白酶在多种温度以及pH 7-9条件下,均可以有效剪切,同时可以耐受一定浓度的咪唑,EDTA,尿素,SDS等抑制成分,使用方便,在多种缓冲液中均可完成酶解。其本身带有一个His-tag标签,酶切后可以方便地除去。还需要注意的是:酿酒酵母来源的SUMO蛋白表达系统是已知最好的促进原核可溶表达的系统之一,远比Ubiquitin,GST,MBP,TRX等系统更加出色。
产品包装和储存
Sumo protease,浓度1 mg/ml,酶活>600 U/μg。长时间可存放于-20℃或-80℃。大包装用前可分装成小管,请勿反复冻融。
注:一个酶活单位定义为:在50 mM Tris,150 mM NaCl,1 mM DTT,pH 8.0酶切缓冲液中,30℃反应1h,酶切>90%的100 pmol标准底物(SUMO-融合蛋白)
酶切能力
在酶切缓冲液中酶切100 μg融合蛋白,反应条件为5℃、16小时、酶切效率≥90%,仅需要0.5μg蛋白酶。在30℃条件下、0.5小时、1 μg Sumo蛋白酶可以酶切200 μg 融合蛋白,酶切效率≥90%。在酶切反应过程中,建议先用不同的酶切时间摸索最佳条件,用SDS-PAGE电泳来评估酶切程度。确定酶切融合蛋白需要的Sumo蛋白酶用量。温度和温浴的时间可以根据不同的目标蛋白而进行改变,应该在实验过程中优化酶切条件。
酶切缓冲液
50 mM Tris,150 mM NaCl,1 mM DTT,pH 8.0(仅有缓冲液即可酶切,例如可以使用10 mM Tris-HCl,pH 8.0)。
• 订购信息
| 名称 | 货号 | 规格 |
| Sumo Protease | SLP00700 | 1 mg |
| SLP00701 | 10 mg | |
| SLP00702 | 100 mg | |
| SLP00703 | 500 mg | |
| SLP00704 | 1 g |